Cryptosporidium “Rapid HotShot Crypto-LAMP” Kit
El Kitabı
Hazırlanma Tarihi- 25.04.2022
Cryptosporidium spp. DNA’sının kalitatif tespiti
Yalnızca hayvan sağlığı için kullanılır
| |
İçindekiler |
10 test |
| 1 |
Cryptosporidium spp. Standard 103 kopya plazmit/ μl |
20 μl |
| 2 |
PCR için uygun distile su |
100 μl |
| 3 |
Test tüpleri |
10 adet |
| 4 |
HotShot solüsyonu |
5 ml |
| 5 |
Nötralizan solüsyonu |
5 ml |
Depolama
Cryptosporidium “Rapid HotShot Crypto-LAMP” Kit iki kutuya sahiptir
- DNA izolasyon kutusu +15, +25 °C arasında saklanmalıdır.
- LAMP kutusu -20° de saklanmalıdır.
Bu şartlar altında kit etikette bulunan son kullanım tarihine kadar stabil olarak kalabilmektedir. Kitte bulunan maddeler 2 kez den fazla dondurulup çözdürülmemelidir. Aksi taktirde kitin hassasiyeti düşebilir.
Kullanım Amacı
ÜÇYILDIZ Cryptosporidium “Rapid HotShot Crypto-LAMP” kiti HotShot DNA izolasyon protokolü kullanarak (Kutu 1) in vitro nükleik asit çoğaltma tekniği olup buzağı dışkıları ve su örneklerinde Cryptosporidium DNA’sını tespit edebilen tanı testidir. HotShot DNA izolasyon protokolü kullanılır (Kutu 1).
ÜÇYILDIZ Cryptosporidium “Rapid HotShot Crypto-LAMP” Kiti, Cryptosporidium enfeksiyonu olan ve tedavi gören hastaların tedavisine yardımcı olarak, tedaviye yanıtı tüm ilgili klinik ve laboratuvar bulgularla birlikte değerlendirmek için tasarlanmıştır.
Kullanım Kısıtlamaları
- Kitte bulunan tüm içerikler sadece hayvan sağlığı için kullanılabilir.
- Bu kit, buzağı dışkısı kullanımı için tasarlanmıştır.
- Bu kit, buzağı dışkısı kullanılarak Üçyıldız HotShot protokolü ile kullanım için tasarlanmıştır.
- Güvenilir bir sonuç, uygun numune toplama, taşıma, depolama ve işleme yöntemlerine bağlıdır.
- Son kullanma tarihi geçmiş kitler kullanılmamalıdır.
- Farklı lotlardan kit bileşenleri karıştırılmamalıdır.
- Bu kit Cryptosporidium tür tayini için uygun değildir.
the earth’s most innovative watchmaking technilogy is existed in cheap https://www.jerseyswholesale.ru/ under $55. replica watches has been happy to watchmaking creativity and integration. bang 41 mm replica watches on sale. the price of cheap https://tomford.to is almost certainly fitted with the extremely take pleasure in. hublot big bang fake from us are excellent in quality and craftsmanship. https://www.celinereplica.ru/ watches and you will understand it!
Ürün Açıklaması
Cryptosporidium “Rapid HotShot Crypto-LAMP” kiti, altı LAMP primerinin kullanıldığı kolorimetrik tabanlı bir LAMP testidir. LAMP tekniği ile DNA replikasyonu sırasında Bst DNA polimeraz ve LAMP primerleri kullanılmaktadır. LAMP prosesinde kolorimetrik ajanın pembeden sarıya dönüşmesi pH değişimine bağlıdır (Şekil 1).
Patojen Bilgisi
Cryptosporidium türleri, dünya çapında hayvancılıkta önemli bağırsak hastalıklarına neden olan bir parazittir. Ayrıca buzağılarda idrar yolu enfeksiyonuna neden olabilir. Buzağılarda en sık görülen ölüm nedenlerinden biri ishal yapan hastalıklarıdır. 30 günlükten küçük buzağılarda Cryptosporidium spp., rotavirus, koronavirüs, Escherichia coli ve Salmonella spp. ciddi bağırsak hasarına neden olmaktadır. Bu bağırsak hasarına bağlı olarak iyileşen buzağılarda malabsorpsiyon, büyüme geriliği ve verim kaybı meydana gelebilir. Özellikle yeni doğan buzağılarda hastalığın erken ve doğru teşhisi çok önemlidir. Ancak Cryptosporidium tanısında sorunlar vardır. Kolorimetrik LAMP testi, tanısal duyarlılık üzerinde iyi bir potansiyele sahiptir. Bu testlerin sahadaki veteriner hekimler tarafından rutin olarak kullanılmasıyla buzağı dışkısında Cryptosporidium tanısının konulması ve daha sonra parazit yükünü azaltmak için hemen antibiyotik tedavisi uygulanması parazitin insanlara ve hayvanlara bulaşmasını önleyebilir.
Uyarılar ve Önlemler
Tüm klinik örnekler ve ortaya çıkan tüm atık materyaller, potansiyel olarak bulaşıcı olarak ele alınmalıdır; numuneler Biyo-güvenlik Seviyesi 2 alanında hazırlanmalıdır.
Çalışmadan önce ve sonra tüm yüzeyler taze hazırlanmış %10 çamaşır suyu solüsyonu ile dezenfekte edilmelidir. Kullanılmayan reaktifler, atıklar ve örnekler ülke veya yerel yönetmeliklere uygun olarak atılmalıdır.
Ağızdan pipetleme yapmayın. Laboratuvar çalışma alanlarında yemek yemeyin, içmeyin veya sigara içmeyin.
Tüm pipetleme cihazlarını ve aletlerini dikkatli kullanın ve üreticinin kalibrasyon ve kalite kontrol talimatlarını izleyin; numune kontaminasyonunu önlemek için yeni, steril aerosol bariyeri veya pozitif yer değiştirmeli Rnase/DNase içermeyen pipet uçları ve steril pipetler kullanın.
Numunelerin veya kontrollerin çapraz kontaminasyonunu önlemek için numune veya kontrol içeren tüm malzemeleri İyi Laboratuvar Uygulamalarına göre kullanın. Kiti herhangi bir kontamine DNA kaynağından, özellikle amplifiye nükleik asitten uzakta saklayın.
Farklı lot numaralarına sahip reaktifleri karıştırmayın veya diğer üreticilerin reaktiflerini değiştirmeyin.
Son kullanma tarihinden sonra kiti kullanmayın
Performans Özellikleri
Analitik Hassasiyet: Analitik duyarlılık, bir seyreltme serisi pozitif kontrol plazmiti kullanılarak analiz edildi. Analizlerin analitik duyarlılığı 1 kopya plazmit/reaksiyondu. Tüm testler üç kez tekrar edildi.
Tanısal Özgüllük: ÜÇYILDIZ Cryptosporidium “Rapid HotShot Crypto-LAMP” Kitinin tanısal özgüllüğünü belirlemek için Cryptosporidium negatif klinik örnekleri analiz edildi. ÜÇYILDIZ Cryptosporidium “Rapid HotShot Crypto-LAMP” Kitinin tanısal özgüllüğü %100’dür. Tüm testler üç kez tekrar edildi.
Çapraz Reaktivite
Bir tahlilin özgüllüğünü incelemek için, potansiyel çapraz reaktif belirteçler için çapraz reaktivite çalışmaları yapılmalıdır.
Bu çalışmada, testin özgüllüğü, pozitif olan 8 patojen test edilerek değerlendirildi.
ÜÇYILDIZ Cryptosporidium “Rapid HotShot Crypto-LAMP” Kiti aşağıdaki tabloda verilen diğer potansiyel çapraz reaktif markörlerle çapraz reaktivite göstermez:
| Organizma |
Kaynak |
Test Sonucu |
| Toxoplasma gondii |
ATCC |
Negatif |
| Plasmodium vivax |
ATCC |
Negatif |
| Entamoeba spp. |
Klinik |
Negatif |
| Acanthomoeba spp. |
Klinik |
Negatif |
| Leishmania infantum
| ATCC |
Negatif |
| Giardia intestinalis |
ATCC |
Negatif |
| Escherichia coli |
ATCC |
Negatif |
| Trichomonas vaginalis |
ATCC |
Negatif |
Örnek hazırlama
Bu kit, buzağı dışkısıyla kullanım için onaylanmıştır. Mikroorganizmaların hastanın anatomik alanına girmesini önlemek ve toplama işlemi sırasında numunenin kontamine olmasını önlemek için toplama sırasında aseptik teknikler kullanılmalıdır. Tüm numuneler potansiyel olarak bulaşıcı olarak kabul edilmelidir ve numune toplama ve işleme sırasında tüm sağlık çalışanları tarafından standart önlemler yönergeleri izlenmelidir. Numuneler laboratuvara gönderilmeden önce uygun kaplara alınmalıdır. Taşıma ve nakliye sırasında numunelerin sızmasını önlemek için kaplarda çatlak olup olmadığını kontrol etmeye ve kapların kapaklarının uygun şekilde sıkıldığından emin olun. Bu, nakliye ve laboratuvar personeli için enfeksiyon tehlikeleri oluşturabilir.
Protokol
DNA izolasyonu
Klinik örneklerden DNA ekstraksiyonu için kite ait HotShot protokolü kullanılmalıdır.
- Mercimek büyüklüğünde veya 100 mikrolitre dışkı örneği 1,5 ml’lik mikro santrifüj tüpüne alınır.
- Mikrosantrifüj tüpüne 100 µl HotShot tamponu eklenir.
- 15 saniye boyunca darbeli girdap ile karıştırın.
- 95 °C’de 30 dakika inkübe edin.
- +4°C’de soğutulur.
- Tüplere 100 µl nötralizasyon tamponu ekleyin.
- 3000 rpm’de 1 dakika santrifüjleyin.
- Süpernatant -20°C’de saklanır.
LAMP protokolü
- Test tüplerini buz üzerinde kullanıma hazır olarak çözün.
- 1 µl DNA numunesi ekleyin (Pozitif kontrol, damıtılmış su veya dışkı DNA’sı)
- Isı bloğunda 58°C’de 60 dakika inkübe edin
- Renk değişimini şekil 1’e göre değerlendirin.
